Великая Отечественная война началась для 23-го иап в 3 ч 15 мин 22 июня 1941 г. с пролета над аэродромом Адамы германского разведчика Ju-88. В 3 ч 45 мин в полку была объявлена тревога, а в 4 ч на летном поле разорвались первые сброшенные немцами бомбы. На 22 июня 1941 г. 23-й иап входил в состав 15-й смешанной авиадивизии, был полностью укомплектован личным составом и имел на вооружении 45 истребителей МиГ-3 и 12 И-153.
22 июня германская авиация бомбила аэродром Адамы от трех до шести раз (в воспоминаниях ветеранов и документах приводятся разные цифры количества налетов) — на отражение второго и последующих налетов взлетали истребители; один бомбардировщик сбили летчики Задворнов и Пойденко, германский самолет упал на землю в районе деревни Каменка. Всего 22 июня летчики 23-го иап сбили четыре самолета противника. Все истребители полка были рассредоточены по границе аэродрома, поэтому серьезного ущерба полку налеты люфтваффе в первый день войны не причинили, хотя потери имели место быть как в технике, так и в людях: погибли летчик Хмелевский и механик Дударь, два истребителя были уничтожены, шесть повреждены. Другие полки 15-й сад понесли от налетов очень серьезные потери, а потому вся тяжесть боевой работы в первые военные дни легла на 23-й иап — летчики выполняли по шесть-семь боевых вылетов в день.
Восстановить достоверную картину того первого, страшного, дня войны сегодня уже вряд ли возможно. В написанном на основе документов и воспоминаний ветеранов в середине 1960-х гг. "Боевом пути гвардейского Краснознаменного Оршанского ордена Суворова III степени авиационного полка" есть следующая запись:
— Внезапное нападение не застало полк врасплох. Все исправные боевые самолеты успели подняться в воздух и успешно отражали налеты авиации противника. Техники и мотористы под бомбежкой и обстрелом противника самоотверженно готовили материальную часть к боевым вылетам.
Комиссар полка гв. майор В. В. Власов
В период действий на Юго-Западном фронте летчики 23-го иап в воздушных боях сбили 28 самолетов противника, уничтожили большое количество техники и живой силы противника. Всего было произведено 790 боевых самолетовылетов с налетом 697 часов 26 мин. Полк последовательно базировался на аэродромах Адамы, Куровице, Зубов, Дворец, Троповка, Носовка. За месяц боев полк лишился 44 самолетов, 30 из которых противник уничтожил на аэродромах. Приказом по Юго-Западному фронту № 06 от 15 июля 1941 г. полк на аэродроме Носовка под Киевом сдал материальную часть в 28-й иап, выбыл из 15 САД и железнодорожным эшелоном убыл на доукомплектование в станицу Крымская, откуда был перебазирован для переформирования в г. Рассказово Тамбовской области. "Старый" 23-й иап четырехэскадрильного состава разделили на два полка двухэскадрильного состава, командир 23-го иап полковник Сидоренко получил под свое начало 28-й иап.
Де-факто полк формировали заново. Из летчиков 23-го иап осталось всего четверо: командир полка капитан (в ходе формирования получил воинское звание майор, ранее командовал 4-й эскадрильей 23- го полка) Метелкин, военный комиссар полка старший политрук Власов, капитан Некрылов и лейтенант Чуланов, остальные летчики вместе с 28-м иап убыли в состав ПВО Москвы. Полк пополнился 14 молодыми летчиками без боевого опыта и двумя опытными воздушными бойцами — майором Угрюмовым и капитаном Андреевым.
По окончанию формирования, 15 сентября 1941 г., 23-й иап был переименован в 526-й иап, но за полком сохранилось Боевое знамя 23-го иап. На вооружение двух эскадрилий поступили 20 истребителей МиГ-3. Как получали МиГ-3, вспоминал инженер полка капитан Лелёкин. При перебазировании в Рассказово инженер заболел дизентерией, а после выздоровления оказался на пункте сбора в Москве:
— Там случайно встретил пять человек летчиков во главе с зам. командира полка, которые прибыли на 1-й завод за самолетами МиГ-3. Завод в это время эвакуировался из Москвы. Все оборудование почти было вывезено на Урал. Я, как сейчас помню, нашел военпреда полковника Кутузова и говорю ему, что к вам прибыли за самолетами, а он отвечает — завод уже не работает давно. Но на границе аэродрома есть 10 МиГ-3, новых, подготовленных к уничтожению: если хотите, дам вам трактор, масло; вытаскивайте, осматривайте, готовьте к полету и улетайте скорее.
Все МиГ-3 я лично осмотрел, моторы опробовал, выполнил регламентные работы, заправил горючим, маслом, водой и выпустил в полет своих летчиков.
Перед отправкой на фронт до личного состава довели приказ Наркома обороны о преобразовании особо отличившихся в боях за Родину частей РККА в гвардейские. Приказ был зачитан перед строем полка. На митинге, посвященном этому приказу, личный состав обязался бить фашистов так, как бьют их первые гвардейские части и самим встать в ряды Советской Гвардии. Цинично говоря, обычный для тех лет митинг, обычные лозунги, но в отличие от многих других частей летчики и техники 526-го иап свои обещания выполнили в полном объеме и в короткий срок.
1 октября 1941 г. 526-й иап перебазировался на Северо-Западный фронт и вошел в состав ВВС 52-й армии, которая 17 октября 1941 г. вошла в состав Волховского фронта. Перебазирование выполнялось в сложных метеоусловиях с пятью промежуточными посадками, но через двое суток все самолеты сосредоточились на аэродроме Коломенка в районе г. Боровичи. Техникам перебазирование далось еще труднее, чем летчикам. Для переброски технического состава выделили один транспортный Дуглас, выполнивший всего два рейса. Забрать всех и всё самолет, понятно, не смог. Железнодорожный эшелон не выделили вовсе. 60 % техников добиралось до Москвы пассажирскими поездами, а из Москвы до аэродрома Коломенка на попутках (!): "Только благодаря высокой дисциплине, спайке, организованности и высокой требовательности командиров, глубокому пониманию своего долго перед Родиной, личный состав своевременно прибыл к месту базирования полка и приступил к выполнению боевых задач".