Биологическая война (Часть 3) - [7]

Белые крысы невосприимчивы к сибирской язве, но инбредные крысы линии Фишер-344 и Вистар чувствительны к токсину В. anthracis. К парентеральному введению В. anthracis чувствительны сирийские золотистые хомячки, суслики, хорьки.

Инфицирующие дозы для животных и людей. Обобщены в работе Н. В. Литусова с соавт. (2002). Величина ингаляционно поражающей дозы (Lct₅₀) для человека составляет около 20×10³ спор, a Lct₅₀ при объеме дыхания человека 10 л/мин — 20×10³ спор×мин×л^-1. Ингаляционные LD₅₀ для морских свинок — 7,75×10⁴, кроликов — 14×10⁴, обезьян — 2,24×10⁴, овец — 1,68×10⁴, собак — 2,21×10⁷, лошадей — 8×10⁶ спор. Величина LD₅₀ для споровой культуры обычно на порядок больше для вегетативных клеток. Восприимчивость человека к ингаляционному поражению сибирской язвой ближе к восприимчивости кроликов, обезьян и овец, которые являются наиболее чувствительными к ингаляционному и подкожному заражению возбудителем сибирской язвы.

^{Рис. 3.2. Микроскопическое изображение В. anthracis. А. Микроскопическая картина клеток В. anthracis, штамм 14/41 в окрашенных мазках культур, выращенных на агаре Хоттингера в течение 24 ч и хранившихся при температуре 0–4 °C 96 ч. Увеличение 1150 раз. Целые клетки окрашены грамположительно (фиолетовый или черно-фиолетовый цвет), визированные клетки выглядят как грамотрицагельные (розового цвета). Б. Прижизненная микроскопическая картина клеток возбудителя сибирской язвы (штамм 4–7), выращенных на агаре Хоттингера в течение 24 ч. Иммобилизация клеток агаровым гелем. Фазовый контраст Увеличение: 1350 раз. Споры светлые и овальные. Бациллы темные, имеют форму удлиненных цилиндров, расположены поодиночке, попарно или соединены в цепочки. Внутри клеток мелкие светящчеся гранулы липидов и крупные, ярко блестящие споры. Лизирующиеся бациллы отличаются пониженной оптической плотностью цитоплазмы В Капсула живых сибиреязвенных бацилл штамма 4–7. Бациллы выращены на бикарбонатном агаре в атмосфере углекислого газа в течение 48 ч Влажный тушевой метод Фа ювый контраст. Увеличение: 1350 раз. Капсула препятствует проникновению туши к клеткам и по этой причине выглядит в виде ореола, окружающего бациллы Г. Зрелая спора В. anthracis, штамм 14/41 при электронной микроскопии. У зрелой споры кортекс электронно-прозрачный Компоненты спор СП — спороплазма; КО — кортекс; СМ — споровая мембрана; СО — споровая оболочка; ЭК — экзоспориум. По А. Г. Золотареву с соавт. (2006)}

При алиментарном заражении LD₅₀В. anthracis для животных, установленные опытным путем, составляли: для морских свинок — 1,62×10⁸ (1,49×10⁸—1,76×10⁸), кроликов — 3,93×10⁸ (3.5×10⁸—4,4×10⁸), обезьян — 2,05×10⁷ (1,6×10⁷—2,6×10⁷) и овец — 5×10⁷ спор. Расчетная LD₅₀ для человека — 1,25×10⁷ спор В. anthracis.

Иммунитет. Лица, перенесшие сибирскую язву, приобретают стойкий, но не абсолютный иммунитет. Известны случаи повторного заболевания кожной формой сибирской язвы через 2 года (Никифоров В. Н., 1973).

Происхождение и молекулярная эпидемиология возбудителя сибирской язвы. Внутри рода Bacillus, возбудитель сибирской язвы относится к группе В. cereus, включающей шесть видов бацилл: В. cereus, В. thuringiensis, В. anthracis, В. weihenstepha.unsis, В. mycoides и В. Dseudomytoides. Патологические процессы у людей вызывают В. cereus и В. anthracis (Klee S. К. et al., 2010). До работы A. R. Hoffmaster et al. (2004) считалось, что В. cereus причастен только к пищевой токсикоинфекции и в затруднительных случаях его можно отличить от сибиреязвенного микроба по наличию у последнего плазмид pXO1 и рХО2. Однако эти авторы описали изолят бациллы, не являющейся В anthracis, но обладающей генами сибиреязвенного токсина и способной вызывать ингаляционное поражение у A/J-мышей, патоморфологически очень похожее на ингаляционную сибирскую язву. Фенотипически и по результатам 16S rRNA-анализа микроорганизм идентифицирован как цереус (В. cereus G9241), но у него обнаружена плазмида, pBCXО1, чья нуклеотидная последовательность на 99,6 % оказалась идентичной кодирующей токсин плазмиде pXO1 В. anthracis И хотя другая плазмида сибиреязвенного микроба, рХО2, кодирующая гены капсулы, обнаружена не была, генный кластер, кодирующий так) ю же капсулу, был обнаружен в ранее неизвестной плазмиде цереуса, названной рВС218. Эволюционное древо, показывающее место В. anthracis среди близкородственных бацилл, приведено на рис. 3.3.

^{Рис. 3.3. Эволюционное и микробиологическое сходстве В. cereus и В. anthracis. A. Эволюционное древо группы В. cereus. Составлено по результатам мультилокусного типирования последовательностей В. cereus G9241 и других пнедставителей рода Bacillus. Б. Капсула В. cereus G9241, выросшей в естественной атмосфере, B. Капсула В. anthracis, выросшей в атмосфере, содержащей 5 % СО, (полоскасоответствует 10 мкм). По A. R. Hoffmaster et al. (2004)}

Дальнейшие исследования показали наличие среди В. cereus штаммов, по плазмидному составу идентичных сибиреязвенному микробу S. К. Klee et al. (2010) описали полную последователь генома бациллы, вызвавшей в 2001–2002 гг. смертельные эпизоотии среди шимпанзе, обитавших во влажных джунглях Национального парка Тай (Tai National Park, Республика Кот-д’Ивуар). По клиническим признакам, патанатомии и гистологии пораженных тканей, болезнь однозначно приняли за сибирскую язву, протекающую с симптомами поражения кишечника и легких. ПЦР в реальном времени подтвердили наличие