Руководство по репродукции и неонатологии собак и кошек - [5]

ВЫЧИСЛЕНИЕ ФЕРТИЛЬНОГО ПЕРИОДА

Учитывая долгий период сексуальной рецептивности у сук, включающий овуляцию и период созревания гамет, фертильным следует считать интервал между 4 и 7 днем после пика концентрации ЛГ. Однако не исключено, что ближе к окончанию фертильного периода способность к оплодотворению снижается, тогда как некоторые ситуации требуют особенно надежного вычисления (например, искусственное осеменение замороженной спермой). Для определения фертильного периода и оптимальных сроков вязки применяют различные методы, к которым относятся вагинальная цитология, вагинальная эндоскопия и анализ концентрации гормонов в сыворотке крови.

Вагинальная цитология

Повышение концентрации эстрадиола в период проэструса стимулирует деление клеток в базальных слоях вагинального эпителия, но затем концентрация эстрадиола, а соответственно и эндокринная поддержка образования нового, многослойного эпителия снижается, поэтому в образце обнаруживается больше мертвых ороговевших клеток. По мере развития проэструса снижается количество эпителиальных клеток, содержащих ядро. С начала до середины проэструса в вагинальных мазках обнаруживают повышенное содержание эритроцитов. Пик ороговения совпадает с началом повышения концентрации прогестерона; однако в начале эструса исследование не обнаруживает характерных особенностей, которые могли бы указывать на начало фертильного периода. Как правило, такой период наступает несколькими днями позже (табл. 1.1). Тем не менее вагинальная цитология остается популярным методом определения репродуктивного статуса суки из-за своей дешевизны, простоты и доступности. Для получения образца используют ватный тампон, предпочтительно небольшой, который вводят во влагалище и осторожно берут мазок. Полученные клетки помещают под микроскоп, а затем окрашивают контрастным (трихромом) или неконтрастным (например, препаратом Diff-Quik) веществом. При таком окрашивании мертвые кератинизированные клетки становятся оранжевыми, тогда как активные ядерные клетки, а также базальные и парабазальные эпителиальные клетки приобретают различные оттенки от голубого до зеленого.

Ближе к окончанию эструса вагинальные выделения претерпевают характерные изменения (снова выявляются эпителиальные клетки, содержащие ядро, и появляется большое количество лейкоцитов). Такая картина обычно наблюдается через 7–9 дней после пика ЛГ и известна как «вагинальный мазок метэструса». Изменению характера выделений предшествует переходный период, характеризующийся возрастающим количеством активных клеток и указывающий на окончание фертильного периода и эструса (табл. 1.1).

Вагинальная цитология весьма информативна в плане определения фазы эстрального цикла, однако значительные расхождения во времени появления основных признаков эструса по отношению к пику фертильности ограничивает применение указанной методики.

Вагинальная эндоскопия

Прекращение секреции эстрадиола фолликулами и переход их к секреции прогестерона приводят к снижению как отечности, так и васкуляризации слизистых оболочек, что сопровождается выраженным изменением характера вагинальных выделений, выявляемым с помощью вагинальной эндоскопии. На стадии проэструса слизистая оболочка становится более выпуклой и отечной, затем наблюдается ее уменьшение; по мере приближения овуляторного пика слизистая сжимается и бледнеет, в некоторых случаях становясь практически белой (фиг. 1.1). Перечисленные изменения свидетельствуют о приближении стадии, характеризующейся постепенным повышением концентрации прогестерона перед овуляцией и последующим наступлением фертильного периода. Эти изменения легко узнать, имея даже небольшую практику (фиг. 1.3), кроме того, они настолько воспроизводимы, что по набору признаков их можно оценивать полуколичественно. Вагинальная эндоскопия весьма полезна в определении оптимальных сроков вязки. По окончании фертильного периода, т. е. в начале метэструса — слизистая оболочка влагалища бледнеет и истончается, складки становятся закругленными — и что, вероятно, является наиболее характерным признаком, — слизистая в переднем отделе влагалища выглядит раздраженной и при прикосновении быстро сжимается, образуя розетку.

Измерение концентрации гормонов

Данные о концентрации прогестерона в сыворотке крови могут служить ориентиром для определения фертильного периода у сук. Механизмы и динамика изменения концентрации прогестерона описаны в предыдущем разделе (фиг. 1.2).

В конце анэструса концентрация прогестерона в сыворотке крови находится на базальном уровне (и практически не определяется), к окончанию проэструса она повышается до низкой, но поддающейся определению отметки (около 3 нмоль/л или 1 нг/мл). И продолжает повышаться, достигая уровня 3–6 нмоль/л (1–2 нг/мл) к моменту овуляторного пика ЛГ; 2 дня спустя (в день овуляции) показатели достигают 6–12 нмоль/л (2–4 нг/мл), а к 4 дню (т. е. к началу фертильного периода) — 18–30 нмоль/л (6–10 нг/мл) (фиг. 1.1). Концентрацию прогестерона определяют в плазме крови, поскольку анализ других жидкостей (слюны и мочи) в настоящее время не дает точных результатов. Исследование проводят после появления первых признаков проэструса и повторяют по меньшей мере каждые 2–3 дня до окончания проэструса или начала поведенческого эструса. Такая методика позволяет выявлять стремительное нарастание концентрации прогестерона перед овуляцией и соответственно рассчитать дату возможной вязки. В случаях очень короткого проэструса исследование начинают раньше.