Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - [39]

Для построения калибровочного графика готовят ряд разведений с различным содержанием билирубина.

К полученным разведениям прибавляют по 1,75 мл кофеинового реактива и по 0,25 мл диазосмеси. При появлении помутнения можно добавить по 3 капли 30%-ного раствора едкого натра. Измерение проводят при тех же условиях, что и в опытных пробах, через 20 мин.

Из компенсационной жидкости готовят разведения, аналогичные калибровочным (табл. 11), и далее обрабатывают их так же, как калибровочные пробы.

Таблица 11

Определения связанного билирубина

Способ II – калибровочный график строится по готовому набору реактивов «Билирубин-эталон» («Лахема»).

Набор Био-Ла-Тест «Билирубин-эталон» включает:

1) билирубин лиофилизированный (точная концентрация билирубина приведена на этикетке флакона);

2) альбумин лиофилизированный.

Способ приготовления растворов билирубина указан в инструкции к набору.

Калибровочная кривая линейна до 170 мкмоль/л.

Примечание

На правильность метода влияет способ построения калибровочной кривой. Ряд веществ – гидрокортизон, андрогены, эритромицин, глюкокортикоиды, фенобарбитал, аскорбиновая кислота – вызывают интерференцию.

Клинико-диагностическое значение

При печеночных желтухах (гепатиты, циррозы) в крови отмечается резкое увеличение содержания билирубинглюкуронида, происходящее главным образом от разрушения печеночных клеток. Повреждение мембран гепатоцитов приводит к выходу в кровь и прямого, и непрямого билирубина.

Некоторое возрастание количества свободного билирубина наступает вследствие нарушения функции печени (уменьшения активности трансглюкуронидазы и других ферментных систем, участвующих в глюкуронидировании).

Значительное увеличение содержания билирубина сыворотки при механических (застойных) желтухах обусловлено переполнением желчных путей вследствие закупорки, разрыва их и перехода желчи в русло крови.

Обтурационные желтухи сопровождаются резким увеличением прямого билирубина в крови. Длительный застой желчи в печени может вызвать воспалительные изменения в гепатоцитах с последующим увеличением содержания непрямого билирубина сыворотки крови.

Резкое возрастание количества свободного билирубина при гемолитической желтухе происходит в результате гемолиза, приводящего к усиленному образованию непрямого билирубина.

Ряд лекарственных препаратов оказывает влияние на содержание общего билирубина. Они усиливают распад эритроцитов. К ним относятся ацетилсалициловая кислота, тетрациклин, хинин и др.

Могут увеличивать уровень прямого билирубина в плазме препараты, вызывающие задержку желчи в печени: пенициллин, эритромицин, сульфаниламидные препараты, эстрогены, пероральные контрацептивы, андрогены, никотиновая кислота.

Методы исследования показателей липидного обмена

К липидам относятся нейтральные жиры (триглицериды), холестерин (общий, свободный и связанный), фосфолипиды, гликолипиды.

Исследования обмена липидов и липопротеинов (ЛП), холестерина (ХС), в отличие от других диагностических тестов имеют социальное значение, так как требуют неотложных мероприятий по профилактике сердечно-сосудистых заболеваний.

Проблема коронарного атеросклероза показала четкую клиническую значимость каждого биохимического показателя как фактора риска ишемической болезни сердца (ИБС), и в последнее десятилетие изменились подходы к оценке нарушений липидного и липопротеинового обменов.

Риск развития атеросклеротического поражения сосудов оценивают по следующим биохимическим тестам:

1) содержание триацилглицеринов (ТГ) в сыворотке крови;

2) содержание общего холестерина (ОХС) в сыворотке крови;

3) содержание холестерина, входящего в состав липопротеинов высокой плотности (ХС-ЛПВП);

4) содержание холестерина, входящего в состав липопротеинов низкой и очень низкой плотности (ХС-ЛПНП и ХС-ЛПОНП);

5) определение отношений ОХС/ХС-ЛПВП, ХС-ЛПНП/ХС-ЛПВП.

Триглицериды

ТГ – нейтральные нерастворимые липиды, поступающие в плазму из кишечника или из печени.

В тонком кишечнике ТГ синтезируются из экзогенных, т. е. поступивших с пищей жирных кислот, глицерола и моноацилглицеролов. Образованные ТГ первоначально поступают в лимфатические сосуды, затем в виде хиломикронов (ХМ) через грудной лимфатический проток поступают в кровоток. Время жизни ХМ в плазме невелико, они поступают к жировым депо организма.

Наличием ХМ объясняется белесый цвет плазмы после приема жирной пищи. ХМ быстро освобождаются от ТГ при участии липопротеинлипазы (ЛПЛ), оставляя их в жировых тканях. В норме после 12-часового голодания ХМ не определяются в плазме. В связи с низким содержанием белка и высоким количеством ТГ ХМ при всех видах электрофореза остаются на линии старта.

Наряду с поступающими с пищей ТГ в печени из эндогенно синтезированных жирных кислот и трифосфоглицерола, источником которого является обмен углеводов, образуются эндогенные ТГ. Эти ТГ транспортируются кровью к жировым депо организма в составе липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП). ЛПОНП являются главной транспортной формой эндогенных ТГ. Содержание ЛПОНП в крови коррелирует с подъемом уровня ТГ. При высоком содержании ЛПОНП плазма крови выглядит мутной.